上海纖檢儀器有限公司主要生產定氮儀和消化爐,脂肪測定儀還有其他分析儀器,上海纖檢儀器用的方法,主要是凱式定氮法,那么除了這種方法外,還有哪幾種可以測定蛋白質的方法,下面,上海纖檢儀器有限公司介紹如下:
一、就是大家熟悉的杜馬斯定氮法
杜馬斯定氮法其測定原理為:樣品在900-1200攝氏度高溫下燃燒,燃燒過程中產生混合氣體,其中的干擾成分被一系列適當的吸收劑所吸收,混合氣體中的氮氧化合物被全部還原成分子氮,隨后氮的含量被熱導檢測器檢測,然后計算。
二、近紅外光譜法
紅外光譜法測定由食品或其他物質中分子引起的輻射吸收然后通過數學模型來計算其含有的某些分子的含量。食品谷物中不同的官能團吸收不同頻率的輻射。近紅外波段的特征吸收可用于測定食品中的蛋白質含量。針對所要測的成分,用近紅外波長的光輻射食品,通過測定樣品反射或透射光的能量可以預測其成分的濃度。
三、 雙縮脲法
當脲被小心地加熱至150-160攝氏度時,可由兩個分子間脫去一個氨分子而生成二縮脲,也叫雙縮脲,雙縮脲與堿及少量硫酸銅溶液作用生成紫紅色的配合物,此反應稱為雙縮脲反應。由于蛋白質分子中含有肽鍵,與雙縮脲結構相似,故也能呈現此反應而生成紫紅色配合物,在一定條件下其顏色深淺與蛋白質含量成正比,據此可用吸光度法來測蛋白質含量,該配合物的最大吸收波長為560nm。
四、 紫外吸收法
蛋白質及其降解產物的芳香環(huán)殘疾,在紫外區(qū)內對一定波長的光具有選擇性吸收作用。在次波長下(280nm),光吸收程度與蛋白質濃度成直線關系,因此,通過測定蛋白質溶液的吸光度,并參照事先用凱氏定氮法測定蛋白質含量的標準樣所做的標準曲線,即可求出樣品蛋白質含量。
考馬斯亮藍G-250是一種蛋白質染料,與蛋白質通過范德華力結合,使蛋白質染色,在620nm處有最大吸收,可用于蛋白質的定量測定。此法簡單而快速,適合大量樣品的測定。
六、 水楊酸比色法
樣品中的蛋白質經硫酸消化而轉化成銨鹽溶液后,在一定的溫度和酸度條件下可與水楊酸鈉和次氯酸鈉作用生成藍色化合物,可以在波長660nm處比色測定,求出樣品含氮量,進而計算出蛋白質含量。
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