飼料中粗蛋白質(zhì)含量是飼料質(zhì)量的一個重要指標(biāo), 目前常用的檢測方法是凱氏定氮法,其通過測定樣品中 總氮量來計(jì)算樣品蛋白質(zhì)含量,適用于各類樣品中蛋白 質(zhì)含量的測定,國內(nèi)外應(yīng)用較為普遍,迄今為止仍是飼 料中蛋白質(zhì)測定的國標(biāo)規(guī)定方法。 全自動凱氏定氮儀同傳統(tǒng)的半微量凱氏蒸餾裝置 相比,全自動凱氏定氮儀的定氮原理與之相同,并具有省時、省力、準(zhǔn)確性高等優(yōu)點(diǎn),因而在飼料行業(yè)得到廣 泛應(yīng)用。但測定粗蛋白的步驟依然繁多,每個步驟、每 個細(xì)節(jié)都有可能人為因素造成誤差,從而表現(xiàn)為結(jié)果的 偏低、偏高以及重復(fù)性不好等幾種形式。本文以KDN-19K型全自動凱氏定氮儀為例,通過對其整個實(shí) 驗(yàn)過程的整理,根據(jù)實(shí)驗(yàn)操作的先后順序,對各步驟中 誤差產(chǎn)生的可能因素和來源進(jìn)行分析,并提出相應(yīng)的避 免或降低誤差的解決方法。
凱氏定氮法測定飼料中蛋白質(zhì)的原理是各種飼料在催化劑(硫酸鉀、硫酸銅)的作用下,用濃硫酸進(jìn)行消化, 使蛋白質(zhì)和氨態(tài)氮都轉(zhuǎn)變成氨氣,并被濃硫酸吸收變?yōu)?硫酸銨,而非含氮物質(zhì),則以二氧化碳、水、二氧化硫 的氣體狀態(tài)逸出。消化液在濃堿的作用下進(jìn)行蒸餾,釋 放出的氨氣隨水蒸氣蒸出并被硼酸液吸收生成硼酸胺, 以甲基紅 - 溴甲酚綠作混合指示劑,用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液滴定, 求出氮的含量,再乘以一定的換算系數(shù)(通常用 6.25 系數(shù)計(jì)算),得出樣品中的粗蛋白質(zhì)的含量。